噬菌体侵染大肠杆菌 噬菌体侵染大肠杆菌实验
噬菌体感染大肠杆菌的实验搅拌离心的目的是将噬菌体蛋白外壳与侵入大肠杆菌的噬菌体DNA分离,从而对放射性元素进行示踪和检测。如何鉴别大肠杆菌噬菌体?首先,这是两种不同的细菌!大肠杆菌又称大肠杆菌,是人体肠道的正常菌群,以大肠杆菌t4噬菌体为例,说明了噬菌体的结构及其在繁殖过程中的吸附作用:噬菌体尾丝的尖端与宿主细胞表面的一种特异性受体接触,尾丝向外伸展并粘附在受体上,从而将棘突和底物固定在细胞表面。
质粒是目的基因的载体。用鸟枪法或合成法提取目的基因后,用限制性内切酶切割质粒,使目的基因和切割的质粒具有相同的粘端,并且它们的碱基正好配对,氢键自动结合,然后在切口处加入DNA连接酶形成重组质粒。原质粒可以看作一个环,是用限制性内切酶将目的基因插入目的基因的两端,然后用DNA分子连接酶将原质粒环上切口的粘性末端连接起来而形成的。
这种携带外源基因进入受体细胞的工具被称为载体。载体的本质是DNA。人工构建的载体不仅可以连接外源基因并导入受体细胞,还可以利用自身的调控系统在新细胞中复制外源基因并表达其功能。目前,将外源基因导入原核细胞的载体研究较多,将外源基因导入动植物细胞的载体仍处于探索阶段。本章以原核细胞载体为重点,讨论了各种载体的结构、功能和构建过程。
常用的三种载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,质粒是最常用的。如生产胰岛素、干扰素、免疫球蛋白、促红细胞生成素、尿激酶、人血红蛋白、人表皮生长因子、粒细胞等稀有药物。动植物也可用于生产疫苗,主要包括乙肝表面抗原基因、口蹄疫病毒蛋白基因、狂犬病病毒G蛋白基因等。转基因植物还可以产生功能性抗体、工业中常用的糖、工业酶和脂肪。
该技术的主要过程包括外源基因的克隆、表达载体的构建、遗传转化体系的建立、遗传转化的筛选、遗传稳定性分析和回交转移。植物转基因技术是通过克隆等方法将外源DNA插入受体细胞。代表性的方法包括载体介导法和直接DNA摄取法。目前应用最广泛、最理想的方法是农杆菌介导法,利用根癌农杆菌等载体将根癌农杆菌植入植物细胞,达到细胞转化的目的。
(yestartificial chemosyacs)YAC 4遗传结构图YAC人工染色体载体是利用酿酒酵母染色体的复制元件构建的载体,其工作环境也是在酿酒酵母中。酿酒酵母的形状为扁圆形和椭圆形,生长时间为90分钟。它包含16条染色体,大小为2251900kb,共14×106 BP;。它具有真核生物mRNA的加工活性。
因为酵母的染色体是线性的,所以它在工作状态下也是线性的。但为了方便制备YAC载体,YAC载体以循环的方式存在,并加入了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记进行保存和增殖。YAC载体的复制元件是其核心元件,其在酵母中复制的必要元件包括自主复制序列(ARS),有丝分裂和减数分裂的着丝粒(centmere),
(1)人工改造的λgt10载体长度为43.4kb,而噬菌体蛋白包装的DNA长度约为36 ~ 51 KB,因此可插入λgt10载体的外源DNA最大长度为5143.47.6 KB。(2) A .如果需要获得大量含有目的基因的噬菌体,应使λ噬菌体保持溶菌状态并删除。b、如果需要在细菌中克隆大量的目的基因,λ噬菌体要处于溶源状态,要删除λ噬菌体的DNA以包含编码蛋白外壳序列,即删除λ噬菌体DNA中的左臂。插入imm434基因。(3)噬菌体蛋白壳的独特成分是S成分。通过35S标记,可以发现噬菌体感染细菌时,蛋白壳并不进入细菌。(5)培养约10小时的大肠杆菌噬菌体的培养液超速离心后,释放的子代噬菌体位于上清液中。所以答案是:(1) 0 ~ 7.6 KB (2)溶源性左臂imm434基因。
只能进入细菌的病毒也叫噬菌体。1.简介1。噬菌体是入侵细菌的病毒,也是赋予宿主细菌生物学特性的遗传物质。噬菌体必须寄生在活细菌中,具有严格的宿主特异性,这取决于噬菌体吸附器官和受体细菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最常见和分布最广的类群。2.噬菌体通常可以在一些充满细菌群落的地方找到,比如土壤和动物肠道。
3.与其他病毒一样,噬菌体只是蛋白质外壳包裹的一团遗传物质,大多数噬菌体也有一条“尾巴”将遗传物质注入宿主体内。噬菌体是一种无处不在的生物,它往往伴随着细菌。4.噬菌体通常可以在一些充满细菌群落的地方找到,比如土壤、动物内脏等。世界上最丰富的噬菌体是海水。二、噬菌体的生物形态体积较小,形状有蝌蚪形、微球形、细长杆形,蝌蚪形较为常见。
大肠杆菌结构简单,有细胞结构、细胞壁、细胞膜、细胞质等结构,没有形成细胞核。细胞壁位于大肠杆菌最外层,约11um厚,分为两层,即外膜和肽聚糖层。外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分,占细胞壁的80%,厚度约为8nm。位于肽聚糖层之外,主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。脂多糖是革兰氏阴性菌的内毒素,是革兰氏阴性菌细胞壁的独特成分,主要与其抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性有关。
大肠杆菌的肽聚糖由多糖链、短肽和肽桥组成。糖链由氨基葡萄糖乙酸酯和乙基苯酚胞壁酸分子通过β 1,4糖苷键连接而成,短肽由L-丙氨酸→D-谷氨酸→外消旋二氨基庚二酸→D-丙氨酸组成,L-丙氨酸与胞壁酸连接。一个多糖链短肽的d-丙氨酸直接与另一个多糖链短肽的外消旋二氨基庚二酸形成肽键(肽桥),使肽聚糖形成网状整体结构。外膜和肽聚糖层通过脂蛋白连接,使大肠杆菌的细胞壁形成一个整体结构。
yout1t7T噬菌体将噬菌体的蛋白质外壳与噬菌体入侵大肠杆菌的DNA分离,从而对放射性元素进行示踪和检测。在本实验中,hershey和Chase分别培养了DNA含有32P标签或蛋白质含有35S标签的T2噬菌体。通过检测32P和35S的放射性,可以追踪噬菌体的DNA和蛋白质外壳。他们发现,噬菌体感染没有同位素标记的大肠杆菌后,35S的蛋白质外壳仍然留在细菌外面,而32P的DNA出现在细菌内部。
吸附:噬菌体尾纤维的尖端与宿主细胞表面的特异性受体接触,尾纤维向外展开并粘附在受体上,从而将刺突和底物固定在细胞表面。入侵:病毒颗粒进入细胞并脱落衣壳,病毒核酸进入细胞。生物合成:病毒核酸复制、转录和蛋白质合成。病毒遗传物质指导细胞执行,多组病毒核酸和衣壳蛋白被合成。组装成许多完整的病毒粒子。释放:病毒颗粒从细胞中释放出来。
9、大肠杆菌噬菌体怎么鉴别首先,这是两种不同的细菌!大肠杆菌是革兰氏阴性菌,革兰氏染色可染红。大肠杆菌又称大肠杆菌,是人体肠道的正常菌群,革兰氏阴性短杆菌,多有周鞭毛,可移动,有菌毛、荚膜和微囊。生化反应发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气,脲酶为阴性,IMViC的实验噬菌体是一种感染微生物如细菌、真菌、放线菌或螺旋体的细菌。
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